De grootste kennisbank van het HBO

Inspiratie op jouw vakgebied

Vrij toegankelijk

Terug naar zoekresultatenDeel deze publicatie

De ontwikkeling en validatie van een UHPLC-DAD-(ESI-MS/MS) methode voor de analyse op acepromazine maleaat, onzuiverheden, nipagin en nipasol in veterinaire farmaceutische producten

Rechten: Alle rechten voorbehouden

De ontwikkeling en validatie van een UHPLC-DAD-(ESI-MS/MS) methode voor de analyse op acepromazine maleaat, onzuiverheden, nipagin en nipasol in veterinaire farmaceutische producten

Rechten: Alle rechten voorbehouden

Samenvatting

In deze studie werd een UHPLC-DAD methode ontwikkeld voor de kwalificatie en kwantificatie op ACE (acepromazine maleaat), onzuiverheden, nipagin en nipasol in L13082904 en L13082906. De bekende onzuiverheden acepromazine S-oxide (ASO), 2-acetylfenothiazine en fenothiazine zullen gekwantificeerd worden met een responsfactor van respectievelijk 1.985, 0.985 en 2.253 op een kalibratielijn van ACE. De ontwikkelde methode kan als een routine analyse bij Produlab Pharma worden toegepast.
Chromatografische scheidingen tussen de componenten werden bewerkstelligd op een Acquity CSH-C18 (75 x 3.0mm, 1.7μm) kolom. De optimale resultaten werden verkregen met een 100 mM ammoniumbuffer (pH 3.8) als mobiele fase A en acetonitril als mobiele fase B, een flow van 1.00 mL/minuut, een injectievolume van 6 μL, een kolomtemperatuur van 50 °C, een golflengte van 254 nm en een totale analyseduur van 10.0 minuten. Het gradiëntsysteem werd toegepast met de volgende tijdsprogramma: T (minuten), A:B (v/v%); T0.1, 83/17, T2.4, 74/26, T5.4, 74/26, T5.5, 55/45, T8.6, 55/45 en T8.7, 83/17. De te analyseren testmonsters moeten opgewerkt worden naar de gewenste concentratie ACE (100 mg/L), nipagin (100 mg/L) en nipasol (10 mg/L).
De methode is volledig gevalideerd op de specificiteit, lineariteit, detectielimieten, precisie, en accuracy volgens de VICH-richtlijnen.
Resultaten van het scheidend vermogen (resolutie, tailing factor en schotelgetal) en de bijbehorende chromatogrammen indiceren op een specifieke methode.
De ontwikkelde methode was lineair voor ACE, nipagin en nipasol tussen een bereik van respectievelijk 50-150, 50-150 en 5-15 mg/L. De bijbehorende correlatiecoëfficiënt waren allen >0.999. De LOQ van ACE, nipagin en nipasol werd theoretisch bepaald op respectievelijk 354, 71 en 70 μg/L. Goede recovery’s (95.63 – 101.79%) en correlatiecoëfficiënten (>0.997) van de analyten op LOQ-niveau werden verkregen om deze limieten te bevestigen. De accuracy van de componenten werd bepaald op drie verschillende concentratieniveaus (80, 100 en 120%). In alle gemeten oplossingen werden de gemiddelde recovery’s tussen de 97.81 en 100.96% gedetermineerd met een maximale RSD% van 1.71. De precisie van de methode werd bepaald op basis van de herhaalbaarheid en intermediaire precisie. Beide kerngrootheden gaven een hoge rendement weer van de componenten. Deze varieerden tussen de 97.81 en 101.58% met een maximale RSD van 1.71%.
Uit de stabiliteit studie is gebleken dat zowel de testoplossingen als de mobiele fase minimaal 3 dagen houdbaar zijn. Er werd geen afbraak of retentieverschuivingen groter dan 5% aangetoond.
Tijdens het stress onderzoek werd ACE onder oxidatieve condities gedegradeerd tot ASO. Door toename van de concentratie waterstofperoxide (10%) kan ACE volledig worden omgezet naar ASO. De blootstelling van ACE aan hydrolytische en thermische omstandigheden vormden geen degradatieproducten. De met zonlicht en UV gestreste testoplossingen indiceert een toename van de ASO. De bijbehorende massa balansen werden allen verklaard.
De onbekende onzuiverheid werd op de UHPLC-DAD-MS/MS geïdentificeerd als een mogelijke molecuul met de brutoformule C19H24N2OS (M =328.1609) of C18H20N2O2S (M = 328.1245). Verdere fragmentatie van het component kan een ondersteunende factor zijn voor de verklaring van de onbekende onzuiverheid. Een andere methodiek is de component opzuiveren met een preparative LC, waarna de massa van de component veel specifieker bepaald kan worden met een LC-IT-TOF.

Toon meer
OrganisatieAvans Hogeschool
OpleidingChemie-Breda
AfdelingATGM Academie voor de technologie van Gezondheid en Milieu
PartnersProdulab Pharma
Datum2014-01-06
TypeBachelor
TaalNederlands

Op de HBO Kennisbank vind je publicaties van 26 hogescholen

De grootste kennisbank van het HBO

Inspiratie op jouw vakgebied

Vrij toegankelijk